Toxoplasma gondii IgM miễn dịch bán tự động - Bộ y tế 2018

I. MỤC ĐÍCH VÀ NGUYÊN LÝ

1. Mục đích

• Phát hiện kháng thể IgM kháng Toxoplasma gondii

2. Nguyên lý

• Phát hiện kháng thể IgM kháng Toxoplasma gondii bằng kỹ thuật ELISA (miễn dịch gắn enzym).

II. CHUẨN BỊ

1. Người thực hiện

•  Người thực hiện: Nhân viên xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ ho c chứng nhận v chuyên ngành Vi sinh/Ký sinh trùng.
•  Người nhận định và phê duyệt kết quả: Người thực hiện có trình độ đại học ho c sau đại học v chuyên ngành Vi sinh/Ký sinh trùng.

2. Phương tiện, hóa chất (Ví dụ hoặc tương đương)

2.1. Trang thiết bị

•  Hệ thống máy ELISA
•  Pipet tự động hay bán tự động đi u chỉnh được dùng phân phối các thể tích từ 2 μl đến 200 μl, 100 μl-1000 μl.
•  Máy ly tâm
•  T lạnh 40C – 8 0C
•  T âm sâu (-200C) ho c (-700C) (nếu có)

2.2 Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)

* Ghi chú:

•  Chi phí ngoại kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình ngoại kiểm (EQAS) là 1/50 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lần ngoại kiểm trung bình 3 lần/1 năm).

3. Bệnh phẩm

• Huyết thanh ho c huyết tương.

4. Phiếu xét nghiệm

• Điền đầy đủ thông tin theo mẫu yêu cầu.

III. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

Các bước tiến hành thực hiện theo phương tiện, hóa chất ví dụ sử dụng sinh phẩm SERION ELISA Toxoplasma gondii IgM

1. Lấy bệnh phẩm

• Theo đúng quy định c a chuyên ngành Vi sinh (Xem Phụ lục).

2. Tiến hành kỹ thuật

• Bộ sinh phẩm SERION ELISA Toxoplasma gondii IgM (VD)

3. Qui trình chạy mẫu SERION ELISA Toxoplasma gondii IgM (VD ho c tương đương):

IV. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

1. Tính giá trị ngưỡng:

- Kết quả được đọc trên máy đọc ELISA và đối với việc đánh giá tự động c a tín hiệu đo lường quang học, các phần m m SERION easyANALYZE, các phần m m SERION đánh giá cũng như phần m m Microsoft® Excel® -dựa trên công cụ phần m m SERION activity có sẵn theo yêu cầu.

- Thử nghiệm có giá trị khi thỏa mãn điều kiện:

•  Giếng trống không chất n n phải là <0,25 OD.
•  Chứng âm: phải âm tính.
•  Bằng cách sử dụng các xét nghiệm định lượng SERION ELISA classic kiểm tra giá trị OD- trung bình (sau khi trừ giếng trống cơ chất) c a huyết thanh chuẩn phải nằm trong phạm vi hiệu chuẩn, được đưa ra trên giấy chứng nhận kiểm soát chất lượng theo lô cụ thể.
•  Bằng cách sử dụng các xét nghiệm định lượng SERION ELISA classic kiểm tra giá trị OD c a chứng dương và giá trị OD trung bình tại ngưỡng huyết thanh phải nằm trong phạm vi hiệu chuẩn, được đưa ra trên giấy chứng nhận kiểm soát chất lượng lô cụ thể (sau khi trừ giếng trống cơ chất).
•  Biến thiên các giá trị OD c a huyết thanh chuẩn ho c huyết thanh tại ngưỡng không thể cao hơn 20%.
•  Nếu các tiêu chí này không được đáp ứng, xét nghiệm không có giá trị phải được l p lại.

3. Diễn giải kết quả

- Các khoảng ranh giới c a xét nghiệm SERION ELISA classic Toxoplasma gondii IgM được quy định trong giấy chứng nhận kiểm tra chất lượng và cho biết ranh giới c a kết quả xét nghiệm:

•  Các giá trị dưới khoảng này: Âm tính;
•  Các giá trị trên phạm vi này: Dương tính.

V. NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ

1. Sai sót

Có thể xảy ra hiện tượng âm tính giả ho c dương tính giả ho c phản ứng không xảy ra thông thường do:

•  Thực hiện sai các bước trong quy trình hướng dẫn.
•  Chứng âm và những mẫu bệnh phẩm âm tính bị nhiễm chéo b i huyết thanh/ huyết tương có nồng độ kháng thể cao.

2. Xử trí

•  Tuân th đúng các bước qui trình hướng dẫn c a nhà sản xuất và hướng dẫn v độ ổn định hóa chất xét nghiệm trong bộ sinh phẩm sử dụng.
•  Kiểm tra và vệ sinh máy rửa thường xuyên trước và sau khi làm xét nghiệm.
•  Không sử dụng thuốc thử đã quá hạn sử dụng.
•  Không nên dùng mẫu đã thấy rõ bị nhiễm khuẩn bằng mắt thường.