Định danh kháng thể aniti-HLA bằng kỹ thuật Elisa - Bộ y tế 2017
I. NGUYÊN LÝ
Dựa trên nguyên lý kết hợp đặc hiệu giữa kháng nguyên và kháng thể, dùng kháng nguyên đã biết để tìm kháng thể chưa biết. Ủ kháng nguyên với kháng thể của người bệnh, sau đó ủ với kháng kháng thể gắn enzyme và chất màu phù hợp. Do enzyme thủy phân chất màu nên khi đọc trên máy quang phổ kế, vị trí nào có sự biến đổi chất màu thì tương ứng có phản ứng kháng nguyên - kháng thể và đọc được tên kháng thể tương ứng.
Nguồn gốc quy trình: theo quy trình kỹ thuật của hãng.
II. CHỈ ĐỊNH
Người bệnh ghép tế bào gốc đồng loại, ghép cơ quan;
III. CHỐNG CHỈ ĐỊNH
Người bệnh ghép tế bào gốc tự thân.
IV. CHUẨN BỊ
1. Người thực hiện
Cán bộ được đào tạo để thực hiện kỹ thuật.
2. Phương tiện-Hóa chất
2.1. Phương tiện:
- Hệ thống ELISA;
- Máy tính và phần mềm phân tích kết quả;
- Micro pipet, đầu côn lọc, ống nghiệm 1,5 ml, hốt vô trùng;
- Găng tay, mũ, khẩu trang.
2.2. Hóa chất:
- Bộ kít xét nghiệm gồm: phiến chạy mẫu gắn kháng nguyên, kháng kháng thể gắn enzyme; chất màu (enzyme A, enzyme B), dung dịch dừng phản ứng (stop reagent), huyết thanh chứng.
- Dung dịch đệm rửa (Wash buffer).
- Dung dịch pha loãng.
3. Mẫu bệnh phẩm
Mẫu máu không chống đông.
V. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
1. Chuẩn bị mẫu
- Ly tâm ống mẫu 3.000v/p trong 10 phút.
- Hút 1ml huyết thanh/huyết tương vào ống eppendorf 1,5 ml.
2. Ủ mẫu với kháng nguyên
- Pha dung dịch huyết thanh chứng (10X) với dung dịch pha loãng để được dung dịch chứng 1X.
- Pha loãng 125μl huyết thanh người bệnh với 375μl dung dịch pha loãng.
- Chuyển 10μl huyết thanh người bệnh đã pha cho vào giếng chạy máy.
- Chuyển 10μl huyết thanh chứng 1X vào vị trí giếng quy định.
- Đậy nắp phiến và ủ ở 20-25oC trong 1giờ.
3. Rửa mẫu
- Vẩy mạnh phiến để loại bỏ dịch nổi.
- Thấm dịch bằng cách úp ngược nhanh phiến vào giấy thấm.
- Thêm 15-20μl đệm rửa 1X vào mỗi giếng, xoay nhẹ; vẩy phiến, thấm dịch.
- Lặp lại bước rửa 2 lần.
4. Ủ mẫu với kháng kháng thể gắn enzyme
- Pha dung dịch kháng kháng thể gắn enzyme 100X về 1X;
- Thêm 10μl dung dịch đã pha vào mỗi giếng;
- Đậy nắp phiến và ủ ở 20-25oC trong 40 phút;
- Loại bỏ dịch nổi giống như bước rửa mẫu, rửa 4 lần.
5. Ủ mẫu với chất màu
- Pha 500μl enzyme A và 500μl enzyme B;
- Thêm 10μl chất màu vào mỗi giếng;
- Đậy nắp phiến, ủ ở nhiệt độ 37oC/10-15 phút, điều kiện tối.
- Thêm 5μl dung dịch dừng phản ứng vào mỗi giếng, đậy nắp và ủ 15 phút.
6. Chạy mẫu
- Chạy kết quả trong vòng 1 giờ với đầu đọc ELISA;
- Phân tích kết quả trên phần mềm.
7. Đọc và trả kết quả xét nghiệm
- Đọc kết quả;
- Ghi kết quả vào phiếu xét nghiệm;
- Ký duyệt và trả kết quả cho bộ phận chỉ định.
Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành Huyết học - Truyền máu - Miễn dịch - Dị ứng - Sinh học phân tử - Bộ y tế 2017
Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành Huyết học - Truyền máu - Miễn dịch - Dị ứng - Sinh học phân tử - Bộ y tế 2017
Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành Hóa sinh - Bộ y tế 2018
Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành Huyết học - Truyền máu - Miễn dịch - Dị ứng - Sinh học phân tử - Bộ y tế 2017
Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành Huyết học - Truyền máu - Miễn dịch - Dị ứng - Sinh học phân tử - Bộ y tế 2017
Xét nghiệm ELISA được khuyến nghị cho những trường hợp đã phơi nhiễm với HIV hoặc có nguy cơ bị lây nhiễm HIV.
Kháng thể đơn dòng là một loại thuốc sinh học được sử dụng để điều trị bệnh viêm khớp dạng thấp khi các loại thuốc khác không hiệu quả. Kháng thể đơn dòng giúp điều trị bệnh viêm khớp dạng thấp thông qua nhiều cơ chế khác nhau.
Thuốc đối kháng thụ thể orexin kép (dual orexin receptor antagonist - DORA) là một nhóm thuốc trị mất ngủ mới. Các loại thuốc này ngăn chặn các tín hiệu thần kinh gây tỉnh táo trong não, nhờ đó giúp dễ ngủ hơn.
Xạ trị lập thể định vị thân (SBRT) là một loại xạ trị đã được sử dụng khá phổ biến trong khoảng 20 năm trở lại đây để điều trị ung thư tuyến tiền liệt.
Trong những trường hợp bệnh ung thư tuyến tiền liệt tiến triển và trở nên kháng cắt tinh hoàn, còn nhiều phương pháp điều trị khác có thể giúp làm chậm sự tiến triển của bệnh, mặc dù các phương pháp này không thể chữa khỏi ung thư. Mục tiêu điều trị chính là ngăn ung thư lan từ tuyến tiền liệt đến các bộ phận ở xa trong cơ thể như cột sống, phổi và não (di căn).
- 1 trả lời
- 2628 lượt xem
- Bác sĩ cho tôi hỏi, vitamin dành cho bà bầu có gây mệt mỏi hoặc buồn nôn không ạ? Cảm ơn bác sĩ!
- 1 trả lời
- 2541 lượt xem
Bé nhà em sinh non lúc mẹ mới 29 tuần 5 ngày, bé nặng 1,3kg ạ. Hiện giờ bé đã được 2 tháng và tăng lên 3,2kg. Em bị mất sữa nên bé không được uống sữa mẹ. Em cho bé uống sữa similac neosure iQ dành riêng co trẻ sinh non bị nhẹ cân. Hàng ngày bé uống 10 cữ, mỗi cữ khoảng 70-80ml. Bé uống vậy có nhiều không ạ? Và sau bao lâu thì em được đổi sang sữa bình thường cho bé? Vì theo như trong lon sữa có ghi là bé đủ 8kg mới đổi sữa ạ.
- 1 trả lời
- 1077 lượt xem
Em sinh bé khi thai mới được 34 tuần. Khi sinh bé nặng 2,3kg. Hiện giờ bé đã được 5 tháng rưỡi và nặng 8,4kg. Từ lúc sinh ra tới giờ em cho bé bú mẹ hoàn toàn. Giờ em muốn cho bé bổ sung thêm sữa công thức nhưng không biết nên bổ sung sữa dành cho trẻ bình thường hay trẻ sinh non ạ? Và bé được 6 tháng tuổi em đã có thể tập cho bé ăn dặm luôn được chưa, hay phải lùi thời gian theo đúng ngày dự sinh của bé ạ?
- 1 trả lời
- 1107 lượt xem
- Thưa bác sĩ, con tôi năm nay 12 tuổi nhưng đã bị cận thị 4 đi - ốp. Bác sĩ cho tôi hỏi, trường hợp của chúa có thể phẫu thuật laser để trị cận thị không ạ?
- 1 trả lời
- 1347 lượt xem
- Thưa bác sĩ, cơ hội thụ thai sẽ được bao nhiêu sau thủ thuật đảo ngược triệt sản ạ? Bác sĩ giải đáp giúp tôi với nhé!